KOGA Mang’Dobara^1,2*, NVEIKOUEING Francis¹, BAMBE Raymond¹, MANDO Ndou Bertrand¹, NUKENINE Elias Nchiwan¹, NDJONKA Dieudonne^1*.

1: University of Ngaoundere; 2: University of Yaounde I; ^*: Corresponding author.

(Submitted on the 1^st of September 2019, accepted on the 31 ^st of January  2020)

Résume

Environ 18 millions de personnes sont infectées par Onchocerca volvulus à travers le monde. L’ivermectine (IVM), médicament de choix utilisé dans le traitement de l’onchocercose est essentiellement microfilaricide et induit des effets indésirables importants notamment chez les malades présentant une charge microfilarienne élevée et dans les zones où l’onchocercose et la loase sont co-endémiques. Dans le but de contribuer au développement de nouvelles molécules anti-onchocerquiennes moins toxiques et actives sur les formes adultes du parasite O. volvulus, l’extrait méthanolique de Canarium shweinfurthii a été testé in vitro sur le parasite des bovins Onchocerca ochengi. Les vers mâles adultes d’O. ochengi ont été incubés à 37° C dans le milieu de culture Roosevelt Parck Memorial Institut (RPMI)-1640 enrichi à la Pénicilline et Streptomycine, en présence de l’extrait de la plante à des différentes concentrations. L’IVM et le RPMI ont servi respectivement des témoins positif et négatif. La mortalité des vers a été déterminée après 48h et 72h d’incubation par le test colorimétrique au Methyl Tetrazolium (MTT). La toxicité aigüe de la plante a été évaluée en administrant aux rats albinos de souche Wistar une dose unique de 2000 mg/kg de l’extrait puis, les paramètres biochimiques des animaux ont été dosés après 14 jours d’observation. L’extrait méthanolique de C.shweinfurthii ainsi que l’IVM ont été létaux pour les parasites. Les concentrations nécessaires pour induire 50% de mortalité (CL₅₀) des vers incubés à 72 heures étaient de 146 ± 34,6 µg/ml pour l’extrait de la plante et de 55.5 ± 8.1 µg/ml pour le control positif. L’analyse phytochimique de l’extrait a révélé la présence des alcaloïdes, composés phénoliques, saponines, quinones, terpénoïdes et glycosides. Aucune mortalité n’a été enregistrée à l’issu de l’étude de la toxicité aigüe et la valeur dose de l’extrait nécessaire pour induire 50% de mortalité (DL₅₀) des rats traités était supérieure à 2000 mg/kg. La comparaison des valeurs des paramètres biochimiques des rats traités et ceux du lot témoin négatif n’ont montré aucune différence significative (P ˃ 0,05).

Ces résultats attestent que l’extrait méthanolique de C. shweinfurthii peut servir de source pour le développement de nouvelles molécules anti onchocerquiennes et justifient l’utilisation de la plante dans le traitement des maladies parasitaires et plusieurs autres affections par les populations locales.

Mots clés : Onchocerca volvulus ; Canarium shweinfurthii ; LC₅₀ ; Toxicité aigüe ; Paramètres biochimiques.

Abstract

An estimated 18 million people carry dermal Onchocerca volvulus around the world. Ivermectin (IVM), the current drug of choice for the treatment of the disease is only microfilaricidal and several adverse effects of this molecule have been reported notably in people with high microfilariae densities and in areas where onchocerciasis and loaisis are co-endemic. Thus, in contributing to the development of new products, safe and active against O. volvulus adult worms, Canarium shweinfurthii methanolic extract was screened in vitro on the adult bovine parasite Onchocerca onchengi. Extracted worms were incubated at 37 °C, in RPMI-1640 supplemented with Penicillin and Streptomycin in the presence of plant extracts at different concentrations. Ivermectin and RPMI served as positive and negative controls respectively. Worm’s mortality was assessed biochemically after 48 h and 72 h using the Dimethylthiazol (MTT)/Formazan colorimetric assay. Acute oral toxicity of plant extracts was evaluated in albino wistar rats with a single dose 2000 mg/kg body weight then biochemical parameters were assessed after 14 days of observation period. C. shweinfurthii extract and also ivermectin exhibited anti-onchocercal activities. Concentrations required to kill 50 % of incubated worms (LC₅₀) after 72 hours were 146.0 ± 34.6 µg/ml and 55.5 ± 8.1 µg/ml for the plant extract and positive control respectively. Phytochemical analysis of the extract revealed the presence of alkaloids, phenolic compounds, flavonoids, saponins, quinones, terpenoids and glycosides. The results of the acute toxicity showed no mortality and LD₅₀ cut off value was observed to be ˃2000 mg/kg bw and there was no significant difference (P ˃ 0.05) between the treated groups and control group in all assessed parameters.

These findings suggest that methanolic extract of Canarium shweinfurthii can serve as source of new anti-onchocercal product development and validate the use of the plant by local populations for the treatment of parasitic disease and many other ailments.

Key words: Onchocerca volvulus; Canarium shweinfurthii; LC₅₀; Acute oral toxicity; biochemical parameters.